固相白色氨基反射層樣品池研制方法獲國家發(fā)明專利授權(quán)

    國家電化學(xué)和光譜分析研究中心潘利華等的一項(xiàng)發(fā)明專利“固相白色氨基反射層樣品池研制方法”獲得了國家知識產(chǎn)權(quán)局的授權(quán)（專利號：200510107412.6）。

    目前，在生物學(xué)研究和臨床免疫分析等主要采用聚苯乙烯（PS）作為固相載體，通過物理吸附作用將生物活性物質(zhì)吸附到固相表面。

    隨著生物醫(yī)學(xué)的迅速發(fā)展，特別核酸探針和蛋白質(zhì)組學(xué)應(yīng)用研究，對免疫分析靈敏度提出了更高的要求。研制新型的免疫分析固相載體和開展活化方法研究，以化學(xué)鍵結(jié)合代替物理吸附，追求生物大分子與固相材料的化學(xué)共價結(jié)合，尤其受到關(guān)注。人們采用各種化學(xué)和物理方法將生物分子共價結(jié)合于固相,包括將聚苯乙烯進(jìn)行化學(xué)修飾，活性基團(tuán)移植和活性分子與聚苯乙烯共聚等。但由于技術(shù)始終不夠成熟,不適合普遍應(yīng)用。因此，研制適于常規(guī)應(yīng)用含活性基團(tuán)的固相材料成為提高超微量免疫分析靈敏度的關(guān)鍵技術(shù)之一。

   本發(fā)明研制不透明固相反射免疫反應(yīng)池的制備方法.研究以載體與蛋白質(zhì)連接研究為基礎(chǔ)，通過在反應(yīng)池內(nèi)壁化學(xué)衍生形成能夠與抗體或抗原共價連接基團(tuán)，實(shí)現(xiàn)共價化學(xué)結(jié)合代替物理吸附，使免疫復(fù)合物牢固結(jié)合。增大抗原或抗體的結(jié)合量，使反應(yīng)池具有較大的S/V比?？朔肿用撀浜褪Щ畹葐栴}，顯著提高了抗原或抗體檢測靈敏度：

    1、用于放射免疫分析，配基結(jié)合率達(dá)43.98%,為PS微孔板的2.5-13.1倍。

    2、破壞性實(shí)驗(yàn)：蛋白質(zhì)完全變性的溫度為65℃，實(shí)驗(yàn)采用50℃保持加溫48小時，本樣品池偶聯(lián)抗體的結(jié)合率仍保持41%，比實(shí)驗(yàn)前降低了4.6%。而PS樣品池結(jié)合率5%，已完全失效。

    3．本樣品池的性能可與與丹麥生產(chǎn)的Nunc Covalink-NH 微孔板相比，實(shí)用性則比其優(yōu)越。例如Nunc板的活性基團(tuán)為-NH，本發(fā)明為-NH2，該基團(tuán)聯(lián)結(jié)蛋白質(zhì)的氨基更容易，更穩(wěn)定；Nunc板售價比PS微孔板貴2倍。本發(fā)明因操作簡便，取材容易，成本只比PS微孔板貴20%左右。

    用本發(fā)明的樣品池既可用于固相免疫分析、放射免疫分析、熒光免疫分析、酶聯(lián)免疫分析、時間分辨熒光免疫分析、DNA芯片等生物技術(shù)分析領(lǐng)域，具有廣闊的應(yīng)用前景和重要的實(shí)用價值。